【脉铂医药】MedBio|ARCA Cy3 EGFP mRNA (5-moUTP)|MED18749|技术资料

1、mRNA基本资料：

Messenger RNA (mRNA）——信使核糖核酸携带遗传信息，在蛋白质合成时充当模板的RNA。信使RNA 从脱氧核糖核酸（DNA）转录合成的带有遗传信息的一类单链核糖核酸（RNA）。它在核糖体上作为蛋白质合成的模板，决定肽链的氨基酸排列顺序。mRNA存在于原核生物和真核生物的细胞质及真核细胞的某些细胞器（如线粒体和叶绿体）中。RNA病毒和RNA噬菌体中的 RNA既是遗传信息的载体又具有mRNA的功能。生物体mRNA种类的多少与生物进化水平有关，高等生物所含的遗传信息多，mRNA的种类也多。生物体内某种mRNA的含量根据需要而有不同，如5龄蚕后部丝腺体的主要任务是快速合成大量丝心蛋白，因而编码丝心蛋白的mRNA含量特别多。有些细菌需要不断适应外部环境，其体内编码某些诱导酶的mRNA的含量也较多。

2、mRNA优势：

（1）插入性突变的风险最小

可以转染非分裂细胞等较难转染的细胞

（2）短期表达且可控

可以精准瞬时地对表达进行调控，并且可以通过生理代谢途径完全讲解。

（3）高效的递送

mRNA针对的是细胞质，只需要穿过质膜即可。相比之下，质粒DNA和大多数类型的病毒载体必须到达细胞核，并穿过格外的膜屏障。

（4）快速的表达水平

转染后6-8小时即可检测到对应的表达，比DNA或者病毒基质的方法更快

3、mRNA转染的优点：

（1） 无需核吸收——蛋白直接在细胞质中表达

（2）其蛋白质表达比DNA转染更快

（3）以完全不依赖启动子的方式表达蛋白质

（4）没有基因组整合的风险

（5）非常适合转染生长缓慢或不分裂的细胞

（6）蛋白表达与mRNA的量直接相关

（7）瞬时转染：蛋白质的表达在有限的时间内持续，避免了与积累有关的毒性

4、 ARCA Cy3 EGFP mRNA (5-moUTP)基本资料及用途：

ARCA Cy3 EGFP mRNA (5-moUTP) 可用于分析mRNA的递送和翻译效率。将ARCA Cy3 EGFP mRNA (5-moUTP)转染到细胞后，细胞可表达EGFP（增强型绿色荧光蛋白）。EGFP蛋白是一种常见的报告分子，激发时会发出强烈且明亮的绿色荧光，其最大激发/发射光波长分别为488 nm /509 nm。该mRNA带有荧光染料Cyanine 3（简称Cy3）标记，用一定波长的光激发时可以直接可视化EGFP mRNA，Cy3的最大激发和发射波长分别为550 nm和570 nm。因此Cy3 EGFP mRNA是独立于翻译确定mRNA递送和定位的理想分子。

该产品已经是5’端加帽，3’端加poly(A)尾，以及经过5-moUTP和Cyanine 3-UTP修饰的mRNA。Cyanine 3-UTP与5-moUTP的添加比例是1:3。使用ARCA以共转录的方式对mRNA进行加帽，形成了Cap 0结构，增加了mRNA的稳定性和翻译效率。修饰核苷酸5-moUTP的添加可以抑制RNA介导的先天免疫激活。Poly(A)尾的添加使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。